聖索非亞大教堂（Aya Sofya）是拜占庭式建築現存的最佳範例，長82公尺寬73公尺高55公尺，教堂內一共使用了107根柱子。聖索菲亞大教堂主要建築材料為磚塊，與使用大理石的希臘建築及使用混凝土的羅馬建築明顯不同。教堂正廳上面覆蓋著直徑達31.24公尺高55.6公尺的巨大中央圓頂，直徑較羅馬萬神殿（Pantheon）的圓頂少了四分之一，但高度卻多了四分之一。
從主入口穿越前廊進入教堂中間最大的那扇門是著名的帝國大門（Imperial door），過去專供皇帝進出教堂所用，門上的鑲嵌畫（Mosaic）描繪基督坐在珠寶裝飾的座位上祝福，代表基督將永恆的力量賜予拜占庭皇帝。
華麗宏偉的中央圓頂是整個教堂最驚人的成就，如何在立方體的建築上放置圓頂，一直是古代建築學上的難題。聖索菲亞大教堂運用的方法是帆拱，四個三角凹面磚石結構將世界上最大的圓頂之一架設在恢弘的大廳上，它由40根強而有力的肋拱支撐，並由特殊的空心磚（產自羅德島的珍貴黏土）建成，圓頂底部每兩個肋之間都有一扇窗戶，這些彩色玻璃窗戶將光線引入大廳各處造成神秘光線的效果，使圓頂看起來像懸浮在正廳之上造成一種沒任何支撐就騰空的效果。
大廳兩側則是用廊柱加以分割的側廳。抬頭仰望可見奧斯曼（Ottoman）統治時期所遺留的多塊直徑7.5公尺的金字圓牌，這些圓牌上分別刻寫著真主、默罕默德、四位哈里發以及默罕默德兩個孫子的名字。
大教堂最東邊即為米哈拉布（Mihrab）所在的凹室，陽光透過土耳其風格的彩窗射入這片半圓形區域。其前面的底部貼著大理石薄片，上半部有一圈墨綠底色的土耳其瓷磚，瓷磚上用金色阿拉伯書法寫著古蘭經抄下的語句。
米哈拉布右邊是木製的敏拜爾（Minbar），這個台階是供神職人員宣講古蘭經使用。敏拜爾偏西的地面上可以看到一塊以彩色大理石裝飾的地面。這個地方被稱為『世界的肚臍』，歷任蘇丹就是在這裡被加冕。
米哈拉布左邊是蘇丹樓座，歷史上教堂內曾先後建造多個蘇丹樓座，現在這座建於1847年。它專為蘇丹舉行一些不需公開的宗教活動所設計的，同時它還兼具保護蘇丹免受行刺。
從大廳退回前廊，教堂前廊分兩層，首先看到的是寬5.75公尺的外部前廊（Outer Narthex），它的裝飾頗為簡單。穿過外部前廊即為內部前廊（Inner Narthex），它們之間有五扇包裹著青銅的橡木大門可供通行。兩者的屋頂都以九道券拱相支撐，以大理石鋪設地面。內部前廊的寬度為9.55公尺，同時也比外部前廊高。通過內部前廊北側的坡道可通往二樓迴廊，南側的一道邊門現在被用作博物館的出口，當初是專供帝王進行宗教儀式用。
帝國大門東南側走廊上有一根名為冒汗柱（Weeping column）的神奇廊柱，早在拜占庭時期，人們就對這根廊柱表面所聚集的潮濕水份驚奇不已。柱上有個小洞，傳說如果將手指伸進小洞，再拿出時手指變濕，所有的病痛將不治而癒。
二樓迴廊被設置成馬蹄形環繞著教堂正廳迄至後殿終止，一般是供皇后及宮廷人員使用，那裡保存著多幅鑲嵌壁畫。這裡的裝飾比較簡單，天花板單純粉刷成黃色然後再勾勒一些簡單的花紋。現在這裡被當成展示鑲嵌畫的藝術館，保存最好的鑲嵌畫位於南側迴廊。二樓迴廊的中央（西側），位於帝國大門正上方的是皇后包廂。
在南東側牆壁上的女皇佐伊（Zoe）鑲嵌畫出自11世紀。畫上的耶穌身穿深藍色長袍。穿著禮服的君士坦丁九世和佐伊女皇分別在耶穌的兩側。君士坦丁九世呈上錢包，象徵他在教堂的奉獻；佐伊女皇手持卷軸，象徵她所作出的奉獻。
出自1122年科穆寧鑲嵌畫與女皇佐伊鑲嵌畫同樣位於南側迴廊東邊牆壁。鑲嵌畫上的聖母瑪利亞身穿深藍色長袍把兒童時的耶穌抱在膝上。約翰二世站在聖母右側，呈上錢包表示皇室對教堂的奉獻。女皇伊林娜站在聖母左側，身穿禮服呈上卷軸。
三聖像鑲嵌畫可能出自1261年，它被用來象徵結束57年羅馬天主教的短暫統治回歸正教信仰。三聖像鑲嵌畫因人物面目柔和神情和善及其格調而被認為教堂內最精美的一幅。
後堂鑲嵌畫位於後堂高處半圓頂。畫上的聖母瑪利亞坐在沒有椅背的寶座上，兒童時期的耶穌在她的膝上，她的雙腳安放在台座上。這幅鑲嵌畫最早源自六世紀，後來在八世紀的聖像破壞運動中被毀壞，之後被修復才有現今模樣。
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